小俊┅┅快┅┅用力啊,高辣慎入hh出轨,艳妇乳肉豪妇荡乳av无码福利,色狠狠色噜噜av天堂五区

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 關(guān)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤的原因分析
關(guān)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤的原因分析
更新時(shí)間:2014-01-08   點(diǎn)擊次數(shù):1408次

    血清是zui常用的標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:

1. 內(nèi)源性物質(zhì)

普遍認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。

 

(1)類(lèi)風(fēng)濕因子

人血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。解決該情況的辦法是:①用F(ab)2替代完整的IgG;②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63℃,10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效);③檢測(cè)抗原時(shí),可以用2-巰基乙醇等加入到標(biāo)本稀釋液中,使RF降解。

(2)補(bǔ)體

ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái),使C1q 可以將二者連接起來(lái),從而造成假陽(yáng)性。解決的辦法是:①用EDTA稀釋標(biāo)本;②用53℃,10 min或56℃,30 min加熱血清使C1q滅活。

(3)嗜異性抗體

人類(lèi)血清中含有能與嚙齒類(lèi)動(dòng)物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來(lái),也能造成假陽(yáng)性。解決的辦法是:可在標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物Ig (s) ,但加入量不足或亞類(lèi)不同時(shí)無(wú)效。

(4)嗜靶抗原的自身抗體

抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體,ELISA試劑盒有時(shí)能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物,在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測(cè)定結(jié)果。為避免以上情況出現(xiàn),解決的辦法是:測(cè)定前需用理化方法將其解離后再測(cè)定。

(5)醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s) 抗體

人ELISA試劑盒臨床開(kāi)展的用鼠源性CD3等單克隆抗體治療,用放射性同位素標(biāo)記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術(shù),均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體;另外,被鼠等嚙齒類(lèi)動(dòng)物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠Ig (s) 抗體。這些病人ELISA測(cè)定時(shí)均可產(chǎn)生假陽(yáng)性。解決的辦法是:測(cè)定抗原時(shí),在標(biāo)本中加入足量的正常鼠Ig (s) ,從而克服由于上述原因造成的假陽(yáng)性。

(6)交叉反應(yīng)物質(zhì)

類(lèi)地高辛、類(lèi)AFP樣物質(zhì)等,是與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。在用多抗測(cè)定抗原時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大,但在用單克隆抗體測(cè)定抗原時(shí),如果交叉抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對(duì)應(yīng)的靶決定簇時(shí),也會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

(7)標(biāo)本中其它成分的影響 血清脂質(zhì)過(guò)高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過(guò)大等,均對(duì)ELISA測(cè)定結(jié)果有干擾作用。

 

2. 外源性物質(zhì)

外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存不當(dāng)?shù)仍蛩?。如?biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。

(1)標(biāo)本溶血   

由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。

(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染   

因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。

(3)標(biāo)本保存不當(dāng)

在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。

(4)標(biāo)本凝集不全

在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;這類(lèi)情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

(5)人ELISA試劑盒標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響

抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用。

通過(guò)以上的分析和總結(jié),臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性等錯(cuò)誤的結(jié)果,排除ELISA試劑盒因素和操作因素,再有就是從標(biāo)本因素進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾,從而確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室

主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA檢測(cè)試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號(hào):滬ICP備14033764號(hào)-3  總訪(fǎng)問(wèn)量:1202009  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線(xiàn)  管理登陸

太子从小h后必须夹玉势sm| 男女交性视频播放| 大肉蒂被嘬的好爽h公主| 亚洲性色精品一区二区在线| 被黑人猛躁10次高潮视频| 99久久人妻无码精品系列| 丰满少妇在线观看网站| 免费看人妻换人妻互换a片爽| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕| 精产国品一二三产区区别是什么| 再深点灬舒服灬受不了了视频| 地瓜视频app免费观看下载| 老汉噗嗤一声整根全进视频| 免费b站在线观看人数在哪儿找| 我和黑帮老大的365天| 99久久久国产精品免费蜜臀| 无码av免费一区二区三区试看| 爆乳2把你榨干哦| 闺蜜撕开的奶罩猛吸我的奶| 欧美黑人狂躁日本妞| 国产嫖妓一区二区三区av视频| 亚洲乱色熟女一区二区三区蜜臀| 国产av无码成人黄网站免费| 精品乱码一区二区三四区视频| 久久久亚洲精品无码| 解开警花的裙子猛烈进入| 日韩精品无码一区aaa片| 性裸交a片a∨天传媒公司| 新婚娇妻陪局长出差bd| 久久亚洲av无码精品色午夜麻豆| 女人下边水润紧致好处| 伊人色综合久久天天五月婷| 一出一进一爽一粗一大视频| 日韩电影一区二区三区| 国产真实乱人偷精品视频| 久久精品一区二区三区四区| 暴虐sm灌浣肠调教a片男男| 韩国午夜理伦三级在线观看中文版| 18禁男男腐啪gv真人视频| 边做边爱mp3在线播放免费观看| 美妙人妻系列|